双孢菇播种时期的选择应视当地气候条件而定，一般当平均温度下降到27～28℃并且气温呈下降趋势时，即可播种。24℃左右最适宜，若温度偏高宁可推迟几天也不能播种。
当然，播种时间也不能因求稳而盲目推迟，否则产菇时间缩短，从而不能高产。一般可根据当地秋菇发生的始期或当地旬均气温降至18℃以下的始期为准，倒查35天左右即为播种时间。
播种量主要以培养料的投料量为依据，结合培养料质量、菌种类型、播种迟早等灵活掌握。一般每立方米菌种用量为750毫升麦粒菌种1～2瓶，500毫升输液瓶2～2.5瓶。
双孢菇培养料是双孢菇生长发育的物质基础，双孢菇菌丝体直接生长在培养料内，出菇以后，子实体生长发育所需要的营养均来自培养料。
为了满足双孢菇的整个生长发育过程中所需要的营养成分，培养料必须有足够量。堆制培养料的目的，主要是通过高温发酵，分解粪、草成分，消除粪臭，杀死害虫和杂草，制造出适于双孢菇生长的，具有良性化性状的培养基质。
双孢菇是草腐菌，能很好地利用多种草本植物秸秆和叶子中的多种营养，如稻草、麦秸、玉米秸、玉米芯等，但是，需要有其他微生物先行将其发酵腐熟，否则不能利用。因此，要先将培养料堆积发酵，然后再播种。双孢菇不能利用硝态氮，能利用铵态氮和有机氮（如尿素、硫酸铵、蛋白质和氨基酸）。
双孢菇栽培基料中，主料占总重量的90%～95%，是双孢菇生长发育的主要营养来源。辅料虽占培养基的5%～10%，但它能补足培养料中的营养成分，调节碳氮比例和酸碱度；改善培养基的理化性状，促进堆料中微生物的活动和繁殖，提高堆料的发酵质量。
