药用真菌高质量总DNA的制备及基因组文库的构建
A METHOD FOR PREPARATION OF HIGH QUALITY GENOMIC DNA FROM MEDICINAL FUNGI AND CONSTRUCTION OF A GENOMIC LIBRARY
程度 黄翔宇 李宝健
分类号：Q939.96 文献标识码：A
文章编号：1007-3515(2002)01-0137-0139
灵芝、姬松茸、灰树花等药用真菌对肿瘤、肝炎、心血管疾病等具有良好的疗效,已引起国际医学界的瞩目.现对药用真菌的研究逐渐深入到分子水平,而提取基因组DNA是进行药用真菌分子生物学研究的基本技术之一.目前适用于灵芝等担子菌纲大型药用真菌DNA提取的方法报道较少.按照曲霉等丝状真菌DNA的提取方法提取灵芝、姬松茸、灰树花的基因组DNA时,不但未能有效除去DNA的多糖,而且所得DNA片段小,构建文库时的转化率低.为此我们建立了一种快速提取高质量基因组总DNA的技术,并在此基础上探索出一种构建高质量基因组文库的方法,为以后进行有关的药用真菌分子生物学研究奠定了基础.……
基金项目：广东省重点科技攻关项目(99-Z-021-01)
作者简介：程度(1972),男,河南人,博士,从事药用真菌的基因工程研究.E-mail:lsbrc12@zsu.edu.cn.
作者单位：程度（中山大学生物工程研究中心,广州,510275）
黄翔宇（中山大学生物工程研究中心,广州,510275）
李宝健（中山大学生物工程研究中心,广州,510275）
参考文献：
［1］J.萨姆布鲁克等,1989. 分子克隆实验指南(第二版).金冬雁等译(1999).北京,科学出版社.1～1062
［2］Donglu Zhang, et al., 1996. A method for the large scale isolation of high transformation efficiency fungal genomic DNA. FEMS Microbiology Letter 145:261-265
［3］HE YQ, 2000. An improved protocol for fungal DNA preparation. 菌物系统, 19(3):434
